第一篇生物化学实验基础知识1

第一章生物化学实验技术发展概况1

第二章生物化学实验室常识介绍3

第二篇现代生物化学实验技术10

第一章离心分离技术10

第二章电泳技术14

第三章分光光度技术22

第四章层析技术25

第五章聚合酶链式反应（PCR）技术38

第三篇生物化学实验42

第一章基础性实验42

第一节糖生物化学实验42

实验一糖的还原性检验42

实验二总糖和还原糖的测定43

Ⅰ费林试剂热滴定法43

Ⅱ3，5－二硝基水杨酸法47

第二节脂类化学实验49

实验三脂肪碘值的测定49

实验四粗脂肪含量的测定——索氏抽提法52

第三节蛋白质化学实验54

实验五蛋白质的呈色反应和沉淀反应54

Ⅰ蛋白质、氨基酸的呈色反应54

Ⅱ蛋白质的沉淀反应57

实验六蛋白质含量测定58

Ⅰ紫外吸收法测定蛋白质含量58

Ⅱ考马斯亮蓝染色法测定蛋白质含量59

Ⅲ双缩脲法测定蛋白质浓度 61

ⅣFolin酚试剂法（Lowry法）测定蛋白质含量62

实验七牛乳中蛋白质的分离和提取64

实验八氨基酸的分离鉴定——纸层析法66

实验九血清蛋白的醋酸纤维薄膜电泳67

实验十凝胶过滤法分离蛋白质69

实验十一葡聚糖凝胶层析71

第四节核酸化学实验73

实验十二核酸含量的测定73

Ⅰ紫外吸收法测定核酸的含量73

Ⅱ二苯胺法测定DNA含量75

实验十三酵母核糖核酸的组分鉴定76

实验十四三种腺苷酸（AMP，ADP，ATP）的分离78

Ⅰ薄层层析分离AMP、ADP和ATP78

Ⅱ醋酸纤维素薄膜电泳分离三种腺苷酸 80

第五节酶学实验82

实验十五酶的特性——底物专一性82

第六节维生素实验84

实验十六维生素A的含量测定——比色法84

第二章综合性实验86

第一节糖化学实验86

实验一天然产物中多糖的分离、纯化与鉴定86

Ⅰ多糖的提取、纯化86

Ⅱ多糖的鉴定87

第二节蛋白质化学实验89

实验二总氮量的测定——凯氏 (MicroKjeldahl)定氮法89

实验三聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清蛋白94

实验四凝胶层析法测定蛋白质相对分子质量97

第三节核酸化学实验100

实验五动物肝脏DNA的提取及含量测定100

实验六质粒DNA的分离、纯化及鉴定102

Ⅰ质粒DNA的分离、纯化102

Ⅱ质粒DNA的琼脂糖凝胶电泳分离鉴定105

实验七PCR扩增DNA107

实验八基因组DNA的提取与检测109

Ⅰ基因组DNA的提取109

Ⅱ基因组DNA的检测111

实验九植物基因组DNA的RAPD多态性分析112

第四节酶学实验115

实验十大蒜细胞SOD的提取与分离115

实验十一过氧化物酶活性的测定117

实验十二乳酸脱氢酶酶活力测定119

实验十三蔗糖酶的提取和比活力测定121

实验十四小麦萌发前后淀粉酶活力的比较124

实验十五胰蛋白酶的制备及活力的测定126

实验十六蛋白水解酶活力的测定129

第五节新陈代谢实验132

实验十七肌糖原的酵解作用132

实验十八脂肪酸β氧化135

第三章设计性实验138

实验一总黄酮的提取和测定139

实验二碱性过硫酸钾氧化紫外分光光度法测总氮139

实验三酶促反应的影响因素140

实验四硝酸还原酶活性的测定140

实验五核酸的提取及性质鉴定141

实验六果蔬维生素C的定量测定142

第四章双语教学选开实验143

Experiment 1Kit for assaying blood glucose (for hand and automatic analyzer)

（实验一血糖分析）143

Experiment 2Determination of Isoelectric Point of Protein——Precipitation Method

（实验二蛋白质等电点测定——沉淀法）145

Experiment 3Experiments of Enzyme Kinetics

（实验三酶动力学实验）147

附录152

附录一常用缓冲液的配制方法152

附录二实验室中常用酸碱的相对密度和浓度158

附录三部分生化仪器的操作规程159

附录四常用生化仪器的使用注意事项161

参考文献165